方法编号:CDC-5512 1. 适用范围:本品适用于谷物、坚果及籽类等物质中黄曲霉毒素B1(简写为AFB1)的现场快速检测。 2. 检测意义:黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种,致癌能力为二甲基亚硝胺的75倍,比二甲基偶氨苯高900倍。黄曲霉毒素B1的极性毒性是氰化钾的10倍,砒霜的68倍,其毒性作用主要是对肝脏的损害。在天然食物中,以黄曲霉毒素B1最为多见,危害性也最强。黄曲霉毒素对光、热、酸较稳定,只有加热到280~300℃才裂解,高压灭菌2小时,毒力降低25%~33%,4小时降低50%。 3. 测定原理:本品采用高度特异性抗体抗原反应及免疫层析分析技术,通过单克隆抗体竞争结合AFB1-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB1的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB1单克隆抗体。检出限为5 ppb(ug/kg)。 4. 黄曲霉毒素B1限量指标:玉米(面、渣、片)及制品为20ppb;花生及其制品为20ppb;稻谷、糙米、大米为10 ppb;小麦及粉、大麦、麦片其他谷物(含去壳谷物)、发酵豆制品为5 ppb;熟制坚果及籽类为5ppb。 6. 样品前处理: 6.1取有代表性样品充分粉碎,准确称取粉碎后的样品1.0g(如果是初筛,比如,可直接取1.0g大米进行检测,发现样品超标后,再将样品粉碎称量检测),于大离心管中,根据不同样品对黄曲霉毒素B1的限量标准要求不同,参考下表加入不同体积的提取液;
6.2将瓶塞盖紧密封,充分振荡3min,静置分层或4000rpm离心1分钟; 6.3取100ul上清液与700ul 稀释液或2滴上清液(吸管每滴=0.035ml)与10滴稀释液(滴瓶每滴=0.05ml)于小试管中,充分混匀后为待检液。 7 测定 7.1 将未开封的试纸卡和含有红色试剂的微孔杯恢复至室温; 7.2 取3滴无气泡的待检液到微孔杯中,缓慢抽吸使待检液变为粉红色; 7.3 将此待检液滴加到平放着的试纸卡加样孔中,开始计时;
7.4 在5min时读取结果,8min后的结果仅作参考。 8 结果判定 8.1阳性:C线显色,T线不显色,判为阳性(超标)。 8.2阴性:C线显色,T线肉眼可见,无论颜色深浅均判为阴性。 8.3无效:C线不显色,无论T线是否显色,该试纸均判为无效。 |