大肠杆菌stec的检测方法 大肠杆菌stec测试片使用说明 方法编号:CDC-5047 1.方法原理及适用范围 1.1大肠杆菌STEC,是肠出血性大肠杆菌的一种,能产生志贺毒素的非O157:H7大肠杆菌,包括了在日本出现的E.coli O111以及2011年在德国及欧洲其他国家出现的E.coli O104。这类大肠杆菌感染后,可引起自限性腹泻、出血性结肠炎和溶血性尿毒综合症(HUS)。一般寄生在牛、羊等家畜和其他反刍动物体内,人类主要是通过未经烹调或烹调不彻底的肉类和奶制品等被感染。 1.2另外有60种STEC血清型在世界各地的腹泻疾病中被发现,一些非O157的血清型已证明与在美国欧洲及亚洲发生的食源性疾病有关。因此,世界各地的监管部门呼吁食品行业,对这些微生物加以重视并采取监管措施。大肠杆菌STEC测试片采用进口高选择性培养基作为主要原料,加入特异性酶显色剂,运用微生物测试片专有技术,做成一次性快速检验产品,一步培养15-~24h就可确认,大大地简化了检测程序,非常适合各级检验部门和食品企业使用。 2操作方法 2.1样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225
mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液。 2.2接种:将大肠杆菌STEC测试片(BS211)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下,每个样品接种两片。 2.3 培 养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为 3结果判读:对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为大肠杆菌STEC;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的话至少再取样重复检验一次。 4附加说明 注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理
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