蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测

酶抑制率(分光光度法)专用试剂(二合一)使用说明

【原理及适用范围】

在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率。

本产品适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。

【样品处理】

整株提取法(适用于韭菜、芹菜等对酶有一些抑制的蔬菜样品)

选取韭菜、芹菜有代表性的样品,擦去表面泥土,称取试样3 g(精确至0.1 g,请勿剪碎)置于20~50mL大小的瓶子,加入10 mL蒸馏水,轻轻振摇50 次,静置5min,用滤纸过滤,取上清滤液待测。

整体测定法

选取油菜、菠菜有代表性的样品,擦去表面泥土,剪成1 cm左右见方碎片,称取3 g(精确至0.1 g)放入50mL取样瓶中,加入10 mL蒸馏水,振摇50次,静置5 min,用滤纸过滤,取上清滤液待测。

【测试】

对照测试:于反应管中加入2.5mL蒸馏水,再加入100μL胆碱酯酶,混匀,放置10 min加入100μL底物显色剂,摇匀并立即倒入比色杯中,放入测试通道,按仪器“对照”键测试3min的吸光度变化值ΔΑ0

样品测试:于反应管中加入2.5mL待测样品液,再加入100μL胆碱酯酶,混匀,放置10min后加入100μL底物显色剂,摇匀并立即倒入比色杯中,放入测试通道,按仪器“样品”键,测试3min的吸光度变化值ΔΑt

操作提示:在加底物显色剂的环节中,可预先将底物显色剂加入比色杯,待静置时间一到,马上将反应管中的反应液倒入已经加有底物显色剂的比色杯,并迅速放入测试通道进行测试。这样可以减少同时检测多个样品时因加底物时间过长而造成的误差。

结果判定:

  以分光光度计测试时,按以下表达式计算出抑制率

抑制率(%)=[(ΔΑ0ΔΑt )/ΔΑ0]×100

以农残检测仪检测时其抑制率一般可自动计算。若样品抑制率≥50%,表示被测果蔬农残超标,为阳性结果。阳性结果的样品需做2次以上重复检测,多次检测仍呈阳性需用气相色谱等仪器做进一步确认。

【注意事项】

酶活性要求:本试剂盒中酶试剂正常活性ΔΑ>0.3。若要求ΔΑ值控制在0.2~0.3之间,可根据ΔΑ测定值自行增减酶量。

保存:试剂盒应保存于4~8℃冰箱,保质期12个月。

使用:任何试剂使用时,用一瓶打开一瓶,用完后才使用新的,防止变质。

器具专用原则:任何用于移液的器具、容器和枪头都应各自做好标记,单独使用,以免交叉污染。

试剂只出不入原则:测试时,从任何试剂瓶吸出的试剂,禁止再次注射回试剂瓶。

环境温度对测试的影响:当环境温度过低时(一般低于20℃),测试时需作必要保温措施;产品从冰箱取出后需恢复到室温才可使用。

 

 

 

 

欢迎进入有问有答√